นิค “Night at the Museum: Kahmunrah Rises Again” ดาลีย์ลังเลที่จะเป็นยามกลางคืนของพิพิธภัณฑ์ และคาห์มันราห์กลับมาเพื่อพิชิตโลก นิทรรศการของพิพิธภัณฑ์ประวัติศาสตร์ธรรมชาติทำให้ยามคนล่าสุดตกใจกลัว แลร์รี เดลลีย์ไม่พอใจอย่างมาก Teddy

Roosevelt และ Sacagawea บอกเขาว่าพวกเขาต้องการให้ Nick ลูกชายของเขาเข้ารับตำแหน่งแทน และหลังจาก Larry ตกลงอย่างไม่เต็มใจ นิคเองกำลังลำบากในขณะที่เขาต้องการเข้าร่วมการแสดงดนตรีแจ๊สของโรงเรียนด้วยการเป็นดีเจของพวกเขา

และเพื่อที่เขาจะได้ใกล้ชิดกับมีอาที่เขาแอบชอบ แม้ว่าครูของเขา Ms. Montefusco จะเห็นคำมั่นสัญญาในตัวเขา แต่ Nick ก็เชื่อว่าเขาล้มเหลว แลร์รี่อธิบายกับนิคว่าในขณะที่เขาจะดูแลพิพิธภัณฑ์ประวัติศาสตร์ในญี่ปุ่น เขาจะทำหน้าที่แทนเขาที่บ้าน

นิคคิดว่าเขาจะล้มเหลว แต่แลร์รี่ก็จัดการให้เอริก้าอดีตภรรยาของเขาเห็นด้วย